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[color=rgb(*, *, *)]學(xué)長介紹:
[color=rgb(*, *, *)]Kin學(xué)長,本科生物技術(shù)專業(yè),雙非本科一戰(zhàn)上岸,21考研初試總分390+,兩門專業(yè)課都是125+,初試排名前三,對分子生物學(xué)與生物化學(xué)的出題規(guī)律較熟悉,對專業(yè)課的學(xué)習(xí)有一定經(jīng)驗(yàn)。
[color=rgb(*, *, *)]一、科目介紹
[color=rgb(*, *, *)]1、考察趨勢:
[color=rgb(*, *, *)]①從19年開始云大的分子與生化大綱基本不變;
[color=rgb(*, *, *)]② 和往年相比,整體內(nèi)容減少,重難點(diǎn)更加偏向王鏡巖《生物化學(xué)》第三版下冊;
[color=rgb(*, *, *)]③題型更簡單:單項(xiàng)選擇題、判斷題、填空題、名稱解釋、問答分析題;
[color=rgb(*, *, *)]④21年的826整體偏易,考的都是最基礎(chǔ)的知識點(diǎn),本來以為會考一些生物技術(shù)問題或者是比較新穎的諾貝爾化學(xué)獎之類的,但都沒有涉及。
[color=rgb(*, *, *)]2、21年考點(diǎn)匯總:
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[color=rgb(*, *, *)]3、總結(jié):
[color=rgb(*, *, *)]大家本科如果學(xué)的是生物類課程,你就會發(fā)現(xiàn)考察的都是特別基礎(chǔ)的東西,只要學(xué)過就應(yīng)該會的。所以大家學(xué)分子與生化的時(shí)候不要太緊張,書本內(nèi)容雖然很多,但考試的時(shí)候老師會照顧大家的,絕對不會考得太深。
[color=rgb(*, *, *)]對于生化的學(xué)習(xí),要求大家廣泛學(xué),重在理解,切忌死記硬背。
[color=rgb(*, *, *)]二、課程資料
[color=rgb(*, *, *)]1、王鏡巖《生物化學(xué)》第三版
[color=rgb(*, *, *)]相當(dāng)于生物人的“圣經(jīng)”,不夸張講,學(xué)好了它生物就能走遍天下。
[color=rgb(*, *, *)]有些人可能想用王鏡巖兩個(gè)學(xué)生出的第四版,其實(shí)兩版內(nèi)容是差不多的,只是有些知識點(diǎn)的講法不太一樣,我們授課還是以第三版為主,最好人手一本。
[color=rgb(*, *, *)]2、《紅寶書》
[color=rgb(*, *, *)]里面為大家總結(jié)好了很詳細(xì)的輔導(dǎo)資料,內(nèi)容也很全面很有針對性,但是不建議大家在基礎(chǔ)階段就看這個(gè)資料,基礎(chǔ)階段必須要以生化這本書為主,只有課本知識達(dá)到一定程度了,這些輔導(dǎo)資料才能幫助你更好地記憶。
[color=rgb(*, *, *)]三、學(xué)習(xí)方法
[color=rgb(*, *, *)]1、課上主要進(jìn)行知識點(diǎn)理解,簡單勾畫重難點(diǎn)
[color=rgb(*, *, *)]2、課下認(rèn)真看書
[color=rgb(*, *, *)]該看的知識點(diǎn)都要看,雖然生化書看起來很痛苦,但其實(shí)你一旦看進(jìn)去,就會發(fā)現(xiàn)好多東西真的很有用,而且很有意思,會幫助我們解決生活中的很多問題。
[color=rgb(*, *, *)]注:826涉及的東西很多,基礎(chǔ)階段需要大家認(rèn)認(rèn)真真看書,學(xué)會理解各種知識點(diǎn)最重要,考試時(shí)也不會考你死記硬背,因此不會為大家畫太細(xì)的背誦內(nèi)容。
[color=rgb(*, *, *)]四、第一章講解:氨基酸
[color=rgb(*, *, *)]1、氨基酸的結(jié)構(gòu)
[color=rgb(*, *, *)](1)定義:蛋白質(zhì)的構(gòu)件分子。
[color=rgb(*, *, *)](2)結(jié)構(gòu)通式:
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[color=rgb(*, *, *)](3)α-氨基酸:羧酸分子中α-碳原子上的一個(gè)氫原子被氨基替代而成的化合物稱α-氨基酸。α-氨基酸是一切蛋白質(zhì)的組成單位。
[color=rgb(*, *, *)](4)蛋白質(zhì)水解方法:蛋白質(zhì)水解的產(chǎn)物即為氨基酸的混合物,不同水解方法各有其優(yōu)缺點(diǎn)(書本123頁)。
[color=rgb(*, *, *)]①酸水解:不引起消旋作用,得到 L-氨基酸,但色氨酸Trp完全被破壞。②堿水解:引起消旋現(xiàn)象,得到 D-和L-氨基酸的混合物,Trp穩(wěn)定 。③酶水解:不引起消旋作用,也不破壞氨基酸,但水解不徹底,只能斷開某幾種氨基酸。(后期還會更詳細(xì)的學(xué)習(xí))
[color=rgb(*, *, *)]三種方法的利弊是考點(diǎn),要注意分析記憶。具有消旋作用的分子式一般*手性碳,即四個(gè)鍵均連著不同的基團(tuán)。
[color=rgb(*, *, *)]2、氨基酸的種類
[color=rgb(*, *, *)](1)三字母簡寫(書本124頁)
[color=rgb(*, *, *)]一共20種,無論大綱上有沒有,都是要求大家熟記的,單字母不用記憶。
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[color=rgb(*, *, *)](2)按R基極性進(jìn)行分類(常考知識點(diǎn)):
[color=rgb(*, *, *)]①非極性氨基酸(8個(gè)):丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸
[color=rgb(*, *, *)]典型脂肪族氨基酸:
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[color=rgb(*, *, *)]R基團(tuán)帶的都是-CH基團(tuán),極性非常小。
[color=rgb(*, *, *)]
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[color=rgb(*, *, *)]甲硫氨酸雖然帶了S,但S周圍仍被-CH包圍,所以極性很弱。脯氨酸R基和α碳上的氨基直接成環(huán),形成亞氨基,極性也很弱。
[color=rgb(*, *, *)]
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[color=rgb(*, *, *)]典型芳香族氨基酸,除了苯環(huán)沒有其他極性很強(qiáng)的基團(tuán)。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]②不帶電荷的極性性氨基酸:絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、甘氨酸。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]有極性,易溶于水。
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[color=rgb(*, *, *)]-OH、-SH(巰基)有極性有極性但沒有酸性堿性氨基酸那么強(qiáng)。
[color=rgb(*, *, *)]注意:只有半胱氨酸里有巰基,二硫鍵就是由兩個(gè)半胱氨酸結(jié)合而成。
[color=rgb(*, *, *)]
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[color=rgb(*, *, *)]苯環(huán)上帶-OH,所以也有極性,但不是特別強(qiáng)。
[color=rgb(*, *, *)]甘氨酸上的-H也有一定極性,但有種說法是甘氨酸處于極性和非極性之間的,這里只需要把它放在極性里記憶就行。
[color=rgb(*, *, *)]
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[color=rgb(*, *, *)]羧基取代上了個(gè)氨基,導(dǎo)致極性沒有那么強(qiáng),但氨基還是有一定極性的。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]③酸性氨基酸:天冬氨酸、谷氨酸將它放入pH為7的中性水溶液中,容易失去質(zhì)子帶負(fù)電荷。
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[color=rgb(*, *, *)]都帶了羧基,容易失去氫離子,帶負(fù)電荷。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]④堿性氨基酸:賴氨酸、精氨酸、組氨酸
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[color=rgb(*, *, *)]*氨基,都帶著正電荷。
[color=rgb(*, *, *)]記憶方法:先記③④后記①②,根據(jù)結(jié)構(gòu)式聯(lián)想著記憶會更容易。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)](3)按R基結(jié)構(gòu)進(jìn)行分類:
[color=rgb(*, *, *)]①芳香族氨基酸(帶苯環(huán)):苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸
[color=rgb(*, *, *)]②雜環(huán)氨基酸:組氨酸、脯氨酸
[color=rgb(*, *, *)]③脂肪族氨基酸:其它的氨基酸
[color=rgb(*, *, *)]2. 氨基酸的性質(zhì)
[color=rgb(*, *, *)](1)酸堿性質(zhì)(書本131-134頁):
[color=rgb(*, *, *)]氨基酸在結(jié)晶形態(tài)或在水溶液中,并不是以游離的羧基或氨基形式存在,而是離解成兩性離子(也稱偶性離子)。在兩性離子中,氨基是以質(zhì)子化(-NH3+)形式存在,羧基是以離解狀態(tài)(-COO-)存在。
[color=rgb(*, *, *)]在不同的pH條件下,兩性離子的狀態(tài)也隨之發(fā)生變化。(-NH3+)一定情況下會失去質(zhì)子,(-COO-)一定情況可以得到質(zhì)子。
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[color=rgb(*, *, *)]氨基酸結(jié)構(gòu)通式的氨基和羧基都是不帶電的,但實(shí)際的存在形式并不是這樣,而是以右面這種游離狀態(tài)存在。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]雖然它們總體的帶電荷量為零,但不同,如下:
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[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]pH計(jì)算公式:
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[color=rgb(*, *, *)](2)等電點(diǎn)(PI):
[color=rgb(*, *, *)]當(dāng)溶液濃度為某一pH值時(shí),氨基酸分子中所含的-NH3+和-COO-數(shù)目正好相等,凈電荷為0。這一pH值即為氨基酸的等電點(diǎn),簡稱pI。在等電點(diǎn)時(shí),氨基酸既不向正極也不向負(fù)極移動,即氨基酸處于兩性離子狀態(tài)。
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[color=rgb(*, *, *)]一般題目中Ka1和Ka2都是給定常數(shù),還是好算的。
[color=rgb(*, *, *)]其實(shí)市面上買來的練習(xí)題中這類題目出現(xiàn)的還是比較多的,但云大考得不多,基本上很少出現(xiàn)。建議大家還是要把計(jì)算過程了解一下,等電點(diǎn)的概念和公式一定要知道。
[color=rgb(*, *, *)]那帶電荷的氨基酸如何計(jì)算等電點(diǎn)呢?
[color=rgb(*, *, *)]以谷氨酸為例:
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[color=rgb(*, *, *)]三個(gè)平衡常數(shù)的話,要先找到A0,不帶電荷的狀態(tài),還按照原來的公式帶入Ka1、Ka2計(jì)算即可。
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[color=rgb(*, *, *)]一樣是要找到A0,然后帶入公式即可。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)](3)氨基酸的化學(xué)反應(yīng)1.α-氨基參與的反應(yīng)
[color=rgb(*, *, *)]①與亞硝酸反應(yīng)與亞硝酸作用生成氮?dú)猓瑒P氏定氮法。根據(jù)氮在蛋白質(zhì)中占比16%,可以通過氮推測蛋白質(zhì)的量。
[color=rgb(*, *, *)]②酰化反應(yīng)與丹磺酰氯反應(yīng),作為氮末端標(biāo)記,可以用來確定某個(gè)氨基酸。
[color=rgb(*, *, *)]③烴基化反應(yīng)與FDNB(2,4-二硝基氟苯)弱堿下反應(yīng),Sanger法:標(biāo)記氮末端來測定肽鏈組成和氨基酸序列,和丹磺酰氯有異曲同工之處。
[color=rgb(*, *, *)]與PITC(苯異硫氰酸酯)弱堿下反應(yīng),Edman法:比FDNB更好用,常用。
[color=rgb(*, *, *)]④形成西佛堿與醛類化合物形成弱堿
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]2.α-羧基參與的反應(yīng)(比較常規(guī)的化學(xué)反應(yīng))①成鹽和成酯反應(yīng)②成酰氯反應(yīng)③脫羧基反應(yīng)④疊氮反應(yīng)
[color=rgb(*, *, *)]3.α-氨基和α-羧基參與的反應(yīng)①與茚三酮反應(yīng)(進(jìn)行定性定量分析):生成紫色物質(zhì),570nm有吸光值,產(chǎn)生的CO2可以定量。脯氨酸和羥脯氨酸反應(yīng)后不產(chǎn)生氨氣,直接產(chǎn)生黃色物質(zhì),440nm有最大吸光值。
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[color=rgb(*, *, *)]②成肽反應(yīng)
[color=rgb(*, *, *)]4.側(cè)鏈R基參加的反應(yīng):
[color=rgb(*, *, *)]①Pauly反應(yīng):檢測酪氨酸、組氨酸
[color=rgb(*, *, *)]②半胱氨酸的巰基(-SH)反應(yīng):半胱氨酸氧化后形成胱氨酸,有二硫鍵(-S-S-)產(chǎn)生。斷開二硫鍵的方法為:氧化法(過甲酸)、還原法(β-巰基乙醇)
[color=rgb(*, *, *)]生活中的例子:卷發(fā)
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[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)](4) 氨基酸的光學(xué)性質(zhì)(143-145頁)
[color=rgb(*, *, *)]①旋光性:除甘氨酸無不對稱碳原子因而無D-及L-型之分外,其它氨基酸有D-及L-型 ,蛋白質(zhì)中存在的除甘氨酸外的氨基酸皆為L-型,在微生物體內(nèi)及抗菌素中亦有D-型氨基酸存在(自由或肽結(jié)合形式)。
[color=rgb(*, *, *)]②光譜性質(zhì):20種蛋白質(zhì)氨基酸只有在紅外區(qū)和紫外區(qū)有吸收光譜。在近紫外區(qū)只有芳香族氨基酸可以吸收光。酪氨酸最大吸收光波長為275nm,苯丙氨酸為257nm,色氨酸為280nm。
[color=rgb(*, *, *)]分光光度法定量分析蛋白質(zhì),測定280nm處吸光值。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]3、氨基酸的分離分配層析法的一般原理(chromatography):層析系統(tǒng)由兩相組成:固相和液相。混合物在其中的分離情況取決于不同組分在這兩相的分配情況,一般用分配系數(shù)K表示。
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[color=rgb(*, *, *)](1)分配柱層析
[color=rgb(*, *, *)]柱內(nèi)有親水性的填充物作支持計(jì),可以吸附水作為固定相;苯酚等不溶水的有機(jī)溶劑作為流動相。流動相流動時(shí),混合物在兩相中不斷分配,不同分配系數(shù)的物質(zhì)洗出速度不同,最后的收集物可以用茚三酮顯色定量。
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[color=rgb(*, *, *)]原理不需要記得一字不差,考試的時(shí)候可能考到實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),你只需要講出這個(gè)方法,并往里面填充一些原理即可。就算直接問你什么叫柱層析,你也只需要根據(jù)自己的理解進(jìn)行描述。
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)](2)紙層析
[color=rgb(*, *, *)]濾紙纖維吸附的水為固定相,展層溶劑為流動相。
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[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)](3)薄層層析(和紙層析原理相同,效率更高)
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[color=rgb(*, *, *)](4)離子交換層析(要理解)
[color=rgb(*, *, *)]利用離子交換樹脂作為支持劑,具有酸性或堿性基團(tuán)。陽離子交換樹脂和陰離子交換樹脂:
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[color=rgb(*, *, *)]
[color=rgb(*, *, *)](5)氣液層析流動相為氣體如氫、氮等,固定相為固體表面顆粒的液體。
[color=rgb(*, *, *)](6)高效液相層析(HPLC)特點(diǎn):
[color=rgb(*, *, *)]①固定相支持劑顆粒細(xì),因此表面積大。
[color=rgb(*, *, *)]②溶劑系統(tǒng)采取高壓,洗脫速度快。
③可替代分配層析、離子交換層析、吸附層析、凝膠過濾等。
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