22云南大學826分子生物學與生物化學專業基礎班開講，速看

云大考研校

[color=rgb(*, *, *)]學長介紹：

[color=rgb(*, *, *)]Kin學長，本科生物技術專業,雙非本科一戰上岸,21考研初試總分390+,兩門專業課都是125+,初試排名前三,對分子生物學與生物化學的出題規律較熟悉,對專業課的學習有一定經驗。

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[color=rgb(*, *, *)]一、科目介紹

[color=rgb(*, *, *)]1、考察趨勢：

[color=rgb(*, *, *)]①從19年開始云大的分子與生化大綱基本不變；

[color=rgb(*, *, *)]② 和往年相比，整體內容減少，重難點更加偏向王鏡巖《生物化學》第三版下冊；

[color=rgb(*, *, *)]③題型更簡單：單項選擇題、判斷題、填空題、名稱解釋、問答分析題；

[color=rgb(*, *, *)]④21年的826整體偏易，考的都是最基礎的知識點，本來以為會考一些生物技術問題或者是比較新穎的諾貝爾化學獎之類的，但都沒有涉及。

[color=rgb(*, *, *)]2、21年考點匯總：





[color=rgb(*, *, *)]3、總結：

[color=rgb(*, *, *)]大家本科如果學的是生物類課程，你就會發現考察的都是特別基礎的東西，只要學過就應該會的。所以大家學分子與生化的時候不要太緊張，書本內容雖然很多，但考試的時候老師會照顧大家的，絕對不會考得太深。

[color=rgb(*, *, *)]對于生化的學習，要求大家廣泛學，重在理解，切忌死記硬背。

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[color=rgb(*, *, *)]二、課程資料

[color=rgb(*, *, *)]1、王鏡巖《生物化學》第三版

[color=rgb(*, *, *)]相當于生物人的“圣經”，不夸張講，學好了它生物就能走遍天下。

[color=rgb(*, *, *)]有些人可能想用王鏡巖兩個學生出的第四版，其實兩版內容是差不多的，只是有些知識點的講法不太一樣，我們授課還是以第三版為主，最好人手一本。

[color=rgb(*, *, *)]2、《紅寶書》

[color=rgb(*, *, *)]里面為大家總結好了很詳細的輔導資料，內容也很全面很有針對性，但是不建議大家在基礎階段就看這個資料，基礎階段必須要以生化這本書為主，只有課本知識達到一定程度了，這些輔導資料才能幫助你更好地記憶。

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[color=rgb(*, *, *)]三、學習方法

[color=rgb(*, *, *)]1、課上主要進行知識點理解，簡單勾畫重難點

[color=rgb(*, *, *)]2、課下認真看書

[color=rgb(*, *, *)]該看的知識點都要看，雖然生化書看起來很痛苦，但其實你一旦看進去，就會發現好多東西真的很有用，而且很有意思，會幫助我們解決生活中的很多問題。

[color=rgb(*, *, *)]注：826涉及的東西很多，基礎階段需要大家認認真真看書，學會理解各種知識點最重要，考試時也不會考你死記硬背，因此不會為大家畫太細的背誦內容。

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[color=rgb(*, *, *)]四、第一章講解：氨基酸

[color=rgb(*, *, *)]1、氨基酸的結構

[color=rgb(*, *, *)]（1）定義：蛋白質的構件分子。

[color=rgb(*, *, *)]（2）結構通式：





[color=rgb(*, *, *)]（3）α-氨基酸：羧酸分子中α-碳原子上的一個氫原子被氨基替代而成的化合物稱α-氨基酸。α-氨基酸是一切蛋白質的組成單位。

[color=rgb(*, *, *)]（4）蛋白質水解方法：蛋白質水解的產物即為氨基酸的混合物，不同水解方法各有其優缺點（書本123頁）。

[color=rgb(*, *, *)]①酸水解：不引起消旋作用，得到 L-氨基酸，但色氨酸Trp完全被破壞。②堿水解：引起消旋現象，得到 D-和L-氨基酸的混合物，Trp穩定 。③酶水解：不引起消旋作用，也不破壞氨基酸，但水解不徹底，只能斷開某幾種氨基酸。（后期還會更詳細的學習）

[color=rgb(*, *, *)]三種方法的利弊是考點，要注意分析記憶。具有消旋作用的分子式一般*手性碳，即四個鍵均連著不同的基團。

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[color=rgb(*, *, *)]2、氨基酸的種類

[color=rgb(*, *, *)]（1）三字母簡寫（書本124頁）

[color=rgb(*, *, *)]一共20種，無論大綱上有沒有，都是要求大家熟記的，單字母不用記憶。





[color=rgb(*, *, *)]（2）按R基極性進行分類（常考知識點）：

[color=rgb(*, *, *)]①非極性氨基酸（8個）：丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸

[color=rgb(*, *, *)]典型脂肪族氨基酸：





[color=rgb(*, *, *)]R基團帶的都是-CH基團，極性非常小。

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[color=rgb(*, *, *)]甲硫氨酸雖然帶了S，但S周圍仍被-CH包圍，所以極性很弱。脯氨酸R基和α碳上的氨基直接成環，形成亞氨基，極性也很弱。

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[color=rgb(*, *, *)]典型芳香族氨基酸，除了苯環沒有其他極性很強的基團。

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[color=rgb(*, *, *)]②不帶電荷的極性性氨基酸：絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、甘氨酸。

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[color=rgb(*, *, *)]有極性，易溶于水。





[color=rgb(*, *, *)]-OH、-SH（巰基）有極性有極性但沒有酸性堿性氨基酸那么強。

[color=rgb(*, *, *)]注意：只有半胱氨酸里有巰基，二硫鍵就是由兩個半胱氨酸結合而成。

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[color=rgb(*, *, *)]苯環上帶-OH，所以也有極性，但不是特別強。

[color=rgb(*, *, *)]甘氨酸上的-H也有一定極性，但有種說法是甘氨酸處于極性和非極性之間的，這里只需要把它放在極性里記憶就行。

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[color=rgb(*, *, *)]羧基取代上了個氨基，導致極性沒有那么強，但氨基還是有一定極性的。

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[color=rgb(*, *, *)]③酸性氨基酸：天冬氨酸、谷氨酸將它放入pH為7的中性水溶液中，容易失去質子帶負電荷。





[color=rgb(*, *, *)]都帶了羧基，容易失去氫離子，帶負電荷。

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[color=rgb(*, *, *)]④堿性氨基酸：賴氨酸、精氨酸、組氨酸





[color=rgb(*, *, *)]*氨基，都帶著正電荷。

[color=rgb(*, *, *)]記憶方法：先記③④后記①②，根據結構式聯想著記憶會更容易。

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[color=rgb(*, *, *)]（3）按R基結構進行分類：

[color=rgb(*, *, *)]①芳香族氨基酸（帶苯環）：苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸

[color=rgb(*, *, *)]②雜環氨基酸：組氨酸、脯氨酸

[color=rgb(*, *, *)]③脂肪族氨基酸：其它的氨基酸

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[color=rgb(*, *, *)]2. 氨基酸的性質

[color=rgb(*, *, *)]（1）酸堿性質（書本131-134頁）：

[color=rgb(*, *, *)]氨基酸在結晶形態或在水溶液中，并不是以游離的羧基或氨基形式存在，而是離解成兩性離子（也稱偶性離子）。在兩性離子中，氨基是以質子化(-NH3+)形式存在，羧基是以離解狀態(-COO-)存在。

[color=rgb(*, *, *)]在不同的pH條件下，兩性離子的狀態也隨之發生變化。（-NH3+）一定情況下會失去質子，（-COO-）一定情況可以得到質子。





[color=rgb(*, *, *)]氨基酸結構通式的氨基和羧基都是不帶電的，但實際的存在形式并不是這樣，而是以右面這種游離狀態存在。

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[color=rgb(*, *, *)]雖然它們總體的帶電荷量為零，但不同，如下：





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[color=rgb(*, *, *)]pH計算公式：

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[color=rgb(*, *, *)]（2）等電點（PI）:

[color=rgb(*, *, *)]當溶液濃度為某一pH值時，氨基酸分子中所含的-NH3+和-COO-數目正好相等，凈電荷為0。這一pH值即為氨基酸的等電點，簡稱pI。在等電點時，氨基酸既不向正極也不向負極移動，即氨基酸處于兩性離子狀態。





[color=rgb(*, *, *)]一般題目中Ka1和Ka2都是給定常數，還是好算的。

[color=rgb(*, *, *)]其實市面上買來的練習題中這類題目出現的還是比較多的，但云大考得不多，基本上很少出現。建議大家還是要把計算過程了解一下，等電點的概念和公式一定要知道。

[color=rgb(*, *, *)]那帶電荷的氨基酸如何計算等電點呢？

[color=rgb(*, *, *)]以谷氨酸為例：





[color=rgb(*, *, *)]三個平衡常數的話，要先找到A0,不帶電荷的狀態，還按照原來的公式帶入Ka1、Ka2計算即可。





[color=rgb(*, *, *)]一樣是要找到A0，然后帶入公式即可。

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[color=rgb(*, *, *)]（3）氨基酸的化學反應1.α-氨基參與的反應

[color=rgb(*, *, *)]①與亞硝酸反應與亞硝酸作用生成氮氣，凱氏定氮法。根據氮在蛋白質中占比16％，可以通過氮推測蛋白質的量。

[color=rgb(*, *, *)]②酰化反應與丹磺酰氯反應，作為氮末端標記，可以用來確定某個氨基酸。

[color=rgb(*, *, *)]③烴基化反應與FDNB（2,4-二硝基氟苯）弱堿下反應，Sanger法：標記氮末端來測定肽鏈組成和氨基酸序列，和丹磺酰氯有異曲同工之處。

[color=rgb(*, *, *)]與PITC（苯異硫氰酸酯）弱堿下反應，Edman法：比FDNB更好用，常用。

[color=rgb(*, *, *)]④形成西佛堿與醛類化合物形成弱堿

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[color=rgb(*, *, *)]2.α-羧基參與的反應（比較常規的化學反應）①成鹽和成酯反應②成酰氯反應③脫羧基反應④疊氮反應

[color=rgb(*, *, *)]3.α-氨基和α-羧基參與的反應①與茚三酮反應（進行定性定量分析）：生成紫色物質，570nm有吸光值，產生的CO2可以定量。脯氨酸和羥脯氨酸反應后不產生氨氣，直接產生黃色物質，440nm有最大吸光值。





[color=rgb(*, *, *)]②成肽反應

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[color=rgb(*, *, *)]4.側鏈R基參加的反應：

[color=rgb(*, *, *)]①Pauly反應：檢測酪氨酸、組氨酸

[color=rgb(*, *, *)]②半胱氨酸的巰基（-SH）反應：半胱氨酸氧化后形成胱氨酸，有二硫鍵（-S-S-）產生。斷開二硫鍵的方法為：氧化法（過甲酸）、還原法（β-巰基乙醇）

[color=rgb(*, *, *)]生活中的例子：卷發





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[color=rgb(*, *, *)]（4） 氨基酸的光學性質（143-145頁）

[color=rgb(*, *, *)]①旋光性：除甘氨酸無不對稱碳原子因而無D-及L-型之分外，其它氨基酸有D-及L-型 ，蛋白質中存在的除甘氨酸外的氨基酸皆為L-型，在微生物體內及抗菌素中亦有D-型氨基酸存在(自由或肽結合形式)。

[color=rgb(*, *, *)]②光譜性質：20種蛋白質氨基酸只有在紅外區和紫外區有吸收光譜。在近紫外區只有芳香族氨基酸可以吸收光。酪氨酸最大吸收光波長為275nm，苯丙氨酸為257nm，色氨酸為280nm。

[color=rgb(*, *, *)]分光光度法定量分析蛋白質，測定280nm處吸光值。

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[color=rgb(*, *, *)]3、氨基酸的分離分配層析法的一般原理(chromatography):層析系統由兩相組成：固相和液相。混合物在其中的分離情況取決于不同組分在這兩相的分配情況，一般用分配系數K表示。





[color=rgb(*, *, *)]（1）分配柱層析

[color=rgb(*, *, *)]柱內有親水性的填充物作支持計，可以吸附水作為固定相；苯酚等不溶水的有機溶劑作為流動相。流動相流動時，混合物在兩相中不斷分配，不同分配系數的物質洗出速度不同，最后的收集物可以用茚三酮顯色定量。





[color=rgb(*, *, *)]原理不需要記得一字不差，考試的時候可能考到實驗設計，你只需要講出這個方法，并往里面填充一些原理即可。就算直接問你什么叫柱層析，你也只需要根據自己的理解進行描述。

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[color=rgb(*, *, *)]（2）紙層析

[color=rgb(*, *, *)]濾紙纖維吸附的水為固定相，展層溶劑為流動相。





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[color=rgb(*, *, *)]（3）薄層層析（和紙層析原理相同，效率更高）





[color=rgb(*, *, *)]（4）離子交換層析（要理解）

[color=rgb(*, *, *)]利用離子交換樹脂作為支持劑，具有酸性或堿性基團。陽離子交換樹脂和陰離子交換樹脂：





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[color=rgb(*, *, *)]（5）氣液層析流動相為氣體如氫、氮等，固定相為固體表面顆粒的液體。

[color=rgb(*, *, *)]（6）高效液相層析（HPLC）特點：

[color=rgb(*, *, *)]①固定相支持劑顆粒細，因此表面積大。

[color=rgb(*, *, *)]②溶劑系統采取高壓，洗脫速度快。

③可替代分配層析、離子交換層析、吸附層析、凝膠過濾等。