【真題】浙江大學2001-2003生化真題

哥是杯具帝

浙江大學2001年攻讀碩士學位研究生入學考試題<生物化學>
注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效
一 是非題1/30
1 酶反應(yīng)的專一性取決于其輔助因子的結(jié)構(gòu)
2 肽酰轉(zhuǎn)移酶在蛋白質(zhì)合成中催化肽鍵的生成和酯鍵的水解
3 E.coli 連接酶摧化兩條游離單鏈DNA分子形成磷酸二酯鍵
4 通過檸檬酸途徑將乙酰輔酶A轉(zhuǎn)移至胞液中,同時可使NADH上的氫傳遞給NADP+生成NADP
H
5 亮氨酸的疏水性比纈氨酸強
6 必需氨基酸是指合成蛋白質(zhì)必不可少的一些氨基酸
7 脯氨酸是α螺旋破壞者
8 維系蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)最重要的作用力是氫鍵
9 在DNA變性過程中總是G-C對豐富區(qū)先解鏈
10 真核細胞中DNA只存在于細胞核中
11 DNA雙螺旋的兩條鏈方向一定是相反的
12 酶影響其催化反應(yīng)的平衡
13 酶促反應(yīng)的米氏常數(shù)與催化的底物無關(guān)
14 維生素E是一種天然的抗氧化劑
15 維生素B1的輔酶形式是TPP
16 ATP是體內(nèi)能量的儲存形式
17 糖酵解過程無需氧氣的參與
18 膽固醇是生物膜的主要成分,可調(diào)節(jié)生物膜的流動性
19 蛋白質(zhì)的生理價值主要取決于必需氨基酸的種類,數(shù)量和比例
20 磷酸吡哆醛只作為轉(zhuǎn)氨酶的輔酶起作用
21 DNA復制時,后滯鏈需多個引物
22 絕緣子和增強子一樣都屬于順式作用元件
23 PCR是包括變性,復性和延伸三個步驟的循環(huán)反應(yīng)
24 Sanger曾兩獲諾貝爾獎
25 核糖體上有三個與tRNA有關(guān)的位點:A位點,P位點,E位點
26 生長激素釋放抑制因子是一個14肽
27 脂肪酸合成酶催化的反應(yīng)是脂肪酸-β氧化反應(yīng)的逆反應(yīng)
28 鐮刀型貧血癥患者血紅蛋白與正常人的血紅蛋白在氨基酸組成上只有2個殘基有差別
29 地球上所有生物中存在的蛋白質(zhì)和核酸的種類總數(shù)都超過1億種
30 中國科學家在今年完成了人類基因組1%的測序任務(wù)
二 寫出下列物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)式1/6
1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸
三 名詞解釋4/24
1 反密碼子 2 操縱基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid )
4 折疊酶 5 共價調(diào)節(jié) 6 Humen Genome Project
四 綜合題10/40
1 試表述Glu經(jīng)脫氨基,有氧氧化等途徑徹底分解成NH3 , CO2, 和H2O 時的代謝路線,要
求用箭頭表示所經(jīng)過的主要中間產(chǎn)物.計算1摩爾Glu共可產(chǎn)生多少摩爾的NH3,CO2,ATP?
2 以血紅蛋白為例說明蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的含義,比較血紅蛋白與肌紅蛋白結(jié)構(gòu)和功能的異
同
3 請對中心法則加以闡述
4 凝膠過濾是分離蛋白質(zhì)混合物最有效的方法之一,請說明其工作原理并簡述用該法分離
蛋白質(zhì)的實驗操作步驟

哥是杯具帝

二、        解析
1、簡述SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳得基本原理，你使用該技術(shù)分離和檢測過何種物質(zhì)？主要操作步驟有哪些？ 字串8
該題是實驗操作中的常考題
SDS-PAGE：當SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合后，蛋白質(zhì)分子即帶有大量的負電荷，從而掩蓋了天然蛋白質(zhì)分子間的電荷差別。與此同時蛋白質(zhì)在SDS的作用下結(jié)構(gòu)變得松散，形狀趨向一致，所以各種SDS -蛋白質(zhì)復合物在電泳時產(chǎn)生的泳動率差異，只反映了分子量的差異，即純利用分子篩效應(yīng)，按蛋白質(zhì)分子量大小進行分離，分子量越大移動越慢。 字串3
?      應(yīng)用
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳還可以用于未知蛋白分子量的測定，在同一凝膠上對一系列已知分子量的標準蛋白及未知蛋白進行電泳，測定各個的標準蛋白的電泳距離（或遷移率），并對各自分子量的對數(shù)（log Mr）作圖，即得到標準曲線。測定未知蛋白質(zhì)的電泳距離（或遷移率），通過標準曲線就可以求出未知蛋白的分子量。
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳經(jīng)常應(yīng)用于提純過程中純度的檢測，純化的蛋白質(zhì)通常在SDS電泳上應(yīng)只有一條帶，但如果蛋白質(zhì)是由不同的亞基組成的，它在電泳中可能會形成分別對應(yīng)于各個亞基的幾條帶。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳具有較高的靈敏度，一般只需要不到微克量級的蛋白質(zhì)，而且通過電泳還可以同時得到關(guān)于分子量的情況，這些信息對于了解未知蛋白及設(shè)計提純過程都是非常重要的。
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳可用于單鏈DNA、寡核苷酸片斷以及蛋白質(zhì)亞基，膜蛋白、肽類等物質(zhì)的分析，還可以用于研究大分子的折疊結(jié)構(gòu)等方面。
?      基本操作
字串5
SDS-PAGE 的基本操作和聚丙烯酰胺凝膠電泳相近，其支持介質(zhì)都是聚丙烯酰胺凝膠，因此在制膠、加樣和電泳儀器都都相同或相近，區(qū)別的是SDS-PAGE需要有標準蛋白溶液及供試品溶液的制備，樣品預(yù)先需要用SDS處理。一般采用取標準蛋白，加水制成每1ml中含2~5mg的溶液，與水解液(取尿素21.6g和十二烷基硫酸鈉0.04g，溶于40ml水中)1∶3混合，置冰箱中過夜。供試品照上述方法配制。此外，在電泳結(jié)束以后，需要對相對遷移率和分子量進行計算 將電泳脫色后的區(qū)帶用卡尺或用掃描定位法測量染料移動的距離、染色前膠條長度、蛋白移動距離和脫色后的膠條長度。
2、質(zhì)粒是基因工程中最常用得載體，為獲得某種質(zhì)粒(如pUC18)DNA，請你設(shè)計一個簡單得實驗過程(步驟)。
大腸桿菌質(zhì)粒DNA的提取（堿裂解法）
此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切PCR擴增。 字串2
1.      取1.5ml細菌培養(yǎng)物于EP管中，4000rpm離心1分鐘，棄上清液，使細菌沉淀盡量干燥；
2.      將細菌沉淀重懸于用冰預(yù)冷的100 μl溶液I (50 mmol/L葡萄糖，10 mmol/L EDTA pH 8.0，25 mmol/L Tris-HCl pH 8.0) 中，劇烈振蕩； 字串4
3.      加入200 μl新配制的溶液II(0.2 mol/L NaOH，1%SDS（m/v）)，蓋緊EP管口，快速顛倒離心管5次，以混合混合物，確保離心管的整個內(nèi)表面與溶液II接觸，不要渦旋，置于冰浴中；
4.      加入150 μl預(yù)冷溶液III(每100 ml 的溶液III中含60 ml 5 mol/L 乙酸鉀，11.5 ml冰乙酸，28.5 ml H2O)，蓋緊EP管口，反復顛倒數(shù)次，使溶液III在粘稠的細菌裂解物中分散均勻，之后將管置于冰上3~5分鐘；
5.      在最大轉(zhuǎn)速下離心5min，取上清液于另一新EP管； 字串7
6.      用兩倍體積的乙醇室溫沉淀雙鏈DNA，振蕩混合于室溫放置2分鐘，最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘；
7.      小心吸去上清液，將離心管倒置于濾紙上，以使所有液體都流出，在將附于管壁的液滴除盡； 字串2
8.      加1ml 70%乙醇洗滌沉淀，振蕩混合，用12,000g離心2分鐘，棄上清，將開口的EP管置于室溫使乙醇揮發(fā)，直至EP管中內(nèi)沒有可見的液體存在（5~10分鐘），用適量的ddH2O溶解；
9.      用0.5μl的RNase 37℃溫育5~10分鐘； 字串6
10.  電泳鑒定。
3、談?wù)勀闼私獾纳锘瘜W近年來的新進展。
自己發(fā)揮，比如：蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能，RNA領(lǐng)域（RNA干擾），酶工程，分子病和遺傳病的研究等等。 字串3
沒有再出過，相當于送分題
4、DNA雙螺旋模型是哪年由誰提出的？請簡述其基本內(nèi)容。為什么說該模型的提出是分子生物學發(fā)展史上的里程碑，具有劃時代的貢獻？ 字串3
DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)模型是在1953年由Watson和Crick兩個人提出的。 字串8
按Watson-Crick模型，DNA的結(jié)構(gòu)特點有：兩條反相平行的多核苷酸鏈圍繞同一中心軸互繞；堿基位于結(jié)構(gòu)的內(nèi)側(cè)，而親水的糖磷酸主鏈位于螺旋的外側(cè)，通過磷酸二酯鍵相連，形成核酸的骨架；堿基平面與軸垂直，糖環(huán)平面則與軸平行。兩條鏈皆為右手螺旋；雙螺旋的直徑為2nm，堿基堆積距離為0.34nm，兩核酸之間的夾角是36°，每對螺旋由10對堿基組成；堿基按A=T，G≡C配對互補，彼此以氫鍵相連系。維持DNA結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的力量主要是堿基堆積力；雙螺旋結(jié)構(gòu)表面有兩條螺形凹溝，一大一小。 字串9
    DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的提出開始, 標志著生物科學的發(fā)展進入了分子生物學階段.分子生物學使生物大分子的研究進入一個新的階段,使遺傳的研究深入到分子層次,"生命之謎"被打開,人們清楚地了解遺傳信息的構(gòu)成和傳遞的途徑.在以后的近50年里,分子遺傳學,分子免疫學,細胞生物學等新學科如雨后春筍般出現(xiàn),一個又一個生命的奧秘從分子角度得到了更清晰的闡明,DNA重組技術(shù)更是為利用生物工程手段的研究和應(yīng)用開辟了廣闊的前景.在人類最終全面揭開生命奧秘的進程中,化學已經(jīng)并將更進一步地為之提供理論指導和技術(shù)支持.
該題太小，以后不大會再出 字串2
5、何謂變性？哪些因素可以引起蛋白質(zhì)的變性？何謂別構(gòu)(變構(gòu))？舉一例說明之。
蛋白質(zhì)受到某些物理或化學因素作用時，引起生物活性的喪失，溶解度的降低以及其它性質(zhì)的改變，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用。變性作用的實質(zhì)是由于維持蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)的次級鍵遭到破壞而造成天然構(gòu)象的解體，但未涉及共價鍵的斷裂。有些變性是可逆的，有些變性是不可逆的。 字串9
引起蛋白質(zhì)的變性的因素有：熱、紫外線照射、高壓和表面張力等物理因素，及有機溶劑、脲、胍、酸、堿等化學因素。 字串2
別構(gòu)效應(yīng)（allosteric effect）某種不直接涉及蛋白質(zhì)活性的物質(zhì)，結(jié)合于蛋白質(zhì)活性部位以外的其他部位（別構(gòu)部位），引起蛋白質(zhì)分子的構(gòu)象變化，而導致蛋白質(zhì)活性改變的現(xiàn)象。可分為同促效應(yīng)和異促效應(yīng)兩類。以氧與血紅蛋白的結(jié)合為例。
該題出現(xiàn)多次，應(yīng)引起重視。 字串7
6、試述三羧酸循環(huán)是如何溝通糖類、脂類、以及蛋白質(zhì)三大有機物的代謝的？ 字串2
一方面，TCA是糖、脂肪、氨基酸等徹底氧化分解的共同末端途徑，另一方面，循環(huán)中生成的草酰乙酸、α-酮戊二酸、檸檬酸、琥珀酰CoA和延胡索酸等又是合成糖、氨基酸、脂肪酸、卟啉等的原料，因而TCA將各種有機物的代謝聯(lián)系起來。TCA是聯(lián)系體內(nèi)三大物質(zhì)代謝的中心環(huán)節(jié)，為合成其它物質(zhì)提供C架。 重要，會是大題中的一個知識點

哥是杯具帝

浙江大學2003年攻讀碩士學位研究生入學考試題<生物化學>
注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效
一 是非題1/20
1 氧化磷酸化作用是ATP的生成基于與相偶聯(lián)的磷酸化作用.( )
2 酶的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì).( )
3 多肽鏈結(jié)構(gòu)中,一個氨基酸殘基就是一個肽單位.( )
4 FMN和FAD的組成中有核黃素.( )
5 在細菌的復制中起主要作用的是DNA聚合酶I( )
6 DNA變性后其粘度增大( )
7乙醛酸循環(huán)在所有的高等植物中都存在.( )
8 EMP途徑本身只產(chǎn)生還原劑,而不產(chǎn)生高能中間產(chǎn)物.( )
9酶促反應(yīng)的能量效應(yīng)是降低反應(yīng)的活化能.( )
10 與膽固醇的化學結(jié)構(gòu)最相近的維生素是維生素B12.( )
11 CoQ只能作為電子傳遞的中間載體.( )
12 DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性主要來自堿基對之間的氫鍵( )
13 組成蛋白質(zhì)的所有氨基酸中,由于含有的α-碳原子屬于不對稱碳原子,因此都具有旋
光性.( )
14 mRNA的3`端polyA結(jié)構(gòu)是由DNA的非編碼區(qū)轉(zhuǎn)錄的.( )
15 糖酵解的限速酶為丙酮酸激酶.( )
16 乙酰輔酶A是進入TCA循環(huán)還是生成酮體,主要由草酰乙酸濃度調(diào)控.( )
17 E.coli RNA 聚合酶的 σ亞基與轉(zhuǎn)錄的終止識別有關(guān).( )
18 氧化還原電對中,電子從電勢較低的電對流向電勢較高的電對,這是自由能降低的現(xiàn)象
.( )
19 葡萄糖和果糖都具有還原性.( )
20 如果加入足夠量的底物,即使有競爭性抑制劑存在,酶催化的最大反應(yīng)速度Vmax是可以
達到的( )
二 寫出下列物質(zhì)的結(jié)構(gòu)式2/10
1 Ser 2 U 3 草酰乙酸 4 ATP 5 D-glucose
三 寫出下列酶催化的生化反應(yīng)式( 不要求寫結(jié)構(gòu)式)3/30
1 磷酸果糖激酶 2 磷酸甘油變位酶 3 丙酮酸脫氫酶系 4 順烏頭酸酶
5 異檸檬酸裂解酶 6 脂酰輔酶A脫氫酶 7 谷丙轉(zhuǎn)氨酶 8 鳥氨酸轉(zhuǎn)氨甲酰酶
9 DNA合成酶 10 氨酰tRNA合成酶
四 綜合題15/90
1 簡述SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳的基本原理,你使用該技術(shù)分離和檢測過何種物質(zhì)?主要操
作步驟有哪些?
2 質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體,為獲得某質(zhì)粒(如pUC18)DNA,請你設(shè)計一個簡單的實
驗過程(步驟).
3 談?wù)勀闼私獾纳锘瘜W近年來的新進展.
4 DNA雙螺旋模型是哪年由誰提出的?簡述其基本內(nèi)容.為什么說該模型的提出是分子生物
學發(fā)展史上的里程碑,具有劃時代的貢獻?
5 何謂變性,那些因素可以引起蛋白質(zhì)的變性?何謂別構(gòu)(變構(gòu))?舉一例說明.
6 試述三羧酸循環(huán)是如何溝通糖類,脂類和蛋白質(zhì)三大有機物的代謝的串9

哥是杯具帝

浙江大學2002年攻讀碩士學位研究生入學考試題
考試科目:生物化學,編號570
注意:答題必須寫在答題紙上,寫在試卷或草稿紙上均無效
一 是非題1/20
1 所謂肽單位就是指組成蛋白質(zhì)的氨基酸殘基
2在競爭性抑制劑存在的情況下,即使加入足夠量的底物,酶仍不能達到其催化的最大反應(yīng)
速度
3 一級結(jié)構(gòu)決定空間結(jié)構(gòu),所以蛋白質(zhì)合成中新生肽鏈的折疊無須其他蛋白質(zhì)的幫助.
4 Sanger反應(yīng)(二硝基氟苯法)用以鑒定多肽鏈羧基末端氨基酸,而Edman反應(yīng)(苯異硫氰酸
酯法)則用以鑒定多肽鏈氨基末端氨基酸.
5 與膽固醇的化學結(jié)構(gòu)最相近的維生素是維生素B12.
6 在某些生物中,RNA也可以是遺傳信息的基本攜帶者
7 生長激素釋放抑制因子是一個14肽
8 維生素B1的輔酶形式是TPP
9 地球上所有生物中存在的蛋白質(zhì)和核酸的種類總數(shù)都超過1億種
10 腎上腺素和胰高血糖素都通過cAMP很快地對機體組織發(fā)揮作用
11 呼吸鏈電子載體是按照其標準勢能逐步下降而氧化還原電勢逐步增加的方向排列的
12 CO對氧化磷酸化的影響主要是抑制ATP的形成過程,但不抑制電子傳遞過程
13 花生四烯酸廣泛存在與植物中,它是哺乳動物的必需脂肪酸
14 即使在饑餓狀態(tài)下,肝臟也不利用酮體作為燃料分子,而大腦組織在血糖供應(yīng)不足時會
利用酮體作為燃料分子供能
15 不同生物對氨基氮的排泄方式不同,如魚類以氨的形式直接將氨基氮排出體外;鳥類以
尿酸形式,植物和動物以尿素形式將氨基氮排出體外
16 紫外輻射引起的DNA損傷可通過光復活作用修復. 光復活酶雖然在生物界分布很廣,從
低等單細胞生物直到鳥類都有,但高等哺乳類中卻沒有
17 逆轉(zhuǎn)錄酶存在與所有RNA病毒中,在RNA病毒復制中起作用
18 遺傳密碼字典在生物界并非完全通用,像原生動物纖毛蟲就有例外
19 糖基化是真核生物蛋白質(zhì)修飾的一種重要方式,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體兩種亞細胞器都能
對蛋白質(zhì)進行糖基化修飾
20 真核生物中同一轉(zhuǎn)錄單位可以通過不同的拼接而產(chǎn)生不同的蛋白質(zhì)合成模板mRNA
二 用化學結(jié)構(gòu)式完成下列酶促反應(yīng)4/20
1異檸檬酸裂解酶 2 丙酮酸羧化酶 3 磷酸戊糖異構(gòu)酶
4 烯脂酰輔酶A水化酶 5 丙氨酰tRNA合成酶
三 綜合題10/60
1 什么是蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)?穩(wěn)定二級結(jié)構(gòu)的主要作用力是什么?多肽鏈中存在的脯氨酸
對α螺旋的形成有何影響,為什么?哪種蛋白質(zhì)完全由α螺旋構(gòu)成?
2 電泳是分離生物大分子的主要方法之一,簡述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳可以測定
蛋白質(zhì)的分子量,其原理是什么? 分子量不同的蛋白質(zhì)在SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中的遷
移率與其分子量有什么關(guān)系?
3 何謂酶促反應(yīng)動力學?底物濃度,溫度和PH值對酶促反應(yīng)速度各有什么影響?試分析之.
如果希望反應(yīng)初速度達到其最大速度的90%,底物濃度應(yīng)為多大?
4 何謂核酸變性?引起核酸變性的因素有哪些?何謂DNA的熔解溫度(Tm)?其大小與哪些因
素有關(guān)?
5從結(jié)構(gòu)和功能兩大方面比較E.coli DNA 聚合酶III和RNA聚合酶
6 Jacob 和Monod在上個世紀60年代初提出乳糖操縱子模型,開創(chuàng)了基因表達調(diào)節(jié)研究的
新領(lǐng)域,具有劃時代意義.請你試述乳糖操縱子理論.