【考研強(qiáng)化班】22云大826生物化學(xué)與分子生物學(xué)專業(yè)強(qiáng)化班

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學(xué)長(zhǎng)介紹：

Kin學(xué)長(zhǎng)，本科生物技術(shù)專業(yè),雙非本科一戰(zhàn)上岸,21考研初試總分390+,兩門專業(yè)課都是125+,初試排名前三,對(duì)分子生物學(xué)與生物化學(xué)的出題規(guī)律較熟悉,對(duì)專業(yè)課的學(xué)習(xí)有一定經(jīng)驗(yàn)。

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一、紅寶書使用方法
大家手里的紅寶書資料就相當(dāng)于知識(shí)點(diǎn)的總結(jié)，它能夠幫助大家更好地背誦和應(yīng)試，但我不建議大家在基礎(chǔ)沒打牢的時(shí)候就直接看紅寶書，生化和分子的教材才是重中之重的。

紅寶書內(nèi)容還是比較全面的。當(dāng)然有些內(nèi)容我們還是要做取舍，有些東西可以不看，有些東西還要進(jìn)行一個(gè)擴(kuò)展補(bǔ)充。大家也要通過生化課本進(jìn)行查漏補(bǔ)缺，通過紅寶書提高效率。

紅寶書在編排上還是非常不錯(cuò)的，每一章都把需要了解記憶的概念列出來了，相當(dāng)于大綱，大家可以對(duì)照著知識(shí)點(diǎn)去檢測(cè)自己這個(gè)地方是否掌握，后面都是有答案，可以自行進(jìn)行校對(duì)掌握。如果覺得答案還不夠詳細(xì)，那就對(duì)照書本進(jìn)行補(bǔ)充。

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二、蛋白質(zhì)知識(shí)點(diǎn)匯總
1、概念

①簡(jiǎn)單蛋白、結(jié)合蛋白、基本氨基酸、等電點(diǎn)；

②甲醛滴定法（不太重要，偏化學(xué)）；

③Edman降解、一級(jí)結(jié)構(gòu)、肽鍵；

④構(gòu)型與構(gòu)象（簡(jiǎn)單了解）、二面角（偏數(shù)學(xué)，不會(huì)考）；

⑤二級(jí)結(jié)構(gòu)、超二級(jí)結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)域、三級(jí)結(jié)構(gòu)、四級(jí)結(jié)構(gòu)、亞基、別構(gòu)蛋白（別構(gòu)效應(yīng)、協(xié)同效應(yīng)...）、分子病（細(xì)胞貧血癥）、水化層、雙電層、蛋白質(zhì)的變形與復(fù)原、鹽析與鹽溶

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2、氨基酸

分類、基本氨基酸的結(jié)構(gòu)、分類、名稱、符號(hào)（三字母）、化學(xué)反應(yīng)、鑒定、蛋白質(zhì)的水解（酶：可能涉及選擇題和大題基因工程等等，要注意）

3、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)

一級(jí)結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、測(cè)定步驟、常用方法、酶；

二級(jí)結(jié)構(gòu)：四種、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)、數(shù)據(jù)、超二級(jí)結(jié)構(gòu)；

三級(jí)結(jié)構(gòu)：主要靠巰水鍵維持；

四級(jí)結(jié)構(gòu)：變構(gòu)現(xiàn)象；

結(jié)構(gòu)與功能的適應(yīng)、結(jié)構(gòu)變化對(duì)功能的影響（別構(gòu)效應(yīng)）、典型蛋白質(zhì)。

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4、蛋白質(zhì)的性質(zhì)

可以和氨基酸的性質(zhì)類比學(xué)習(xí)；分子量的測(cè)定方法、酸堿性、溶解性、變形、顏色反應(yīng)。

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三、蛋白質(zhì)具體復(fù)習(xí)
第一節(jié):蛋白質(zhì)通論
（一）蛋白質(zhì)的功能多樣性（蛋白質(zhì)的幾個(gè)作用一定要記憶）

1. 催化功能：蛋白酶

2. 結(jié)構(gòu)功能：結(jié)構(gòu)蛋白，像細(xì)胞里的骨架蛋白、細(xì)胞膜里的蛋白質(zhì)

3. 運(yùn)輸功能：血紅蛋白運(yùn)輸氧氣、二氧化碳

4. 貯存功能：卵清蛋白提供能量

5. 運(yùn)動(dòng)功能：馬達(dá)蛋白、有絲分裂過程中紡錘絲將染色體拉向兩端

6. 防御功能：抗體

7. 調(diào)節(jié)功能：激素

8. 信息傳遞功能：一些信號(hào)分子，和激素相像。更多指的是受體、視覺信息傳遞等等。

9. 遺傳調(diào)控功能：DNA復(fù)制、組蛋白

（二）蛋白質(zhì)的分類

1. 按分子形狀分類（1）球狀蛋白（2）纖維狀蛋白

2. 按分子組成分類

（1）簡(jiǎn)單蛋白：氨基酸鏈組成

（2）結(jié)合蛋白：除了氨基酸還會(huì)有其他的基團(tuán)或者金屬離子（輔基）

通過這些輔基進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)。

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（三）蛋白質(zhì)的元素組成與分子量

1.元素組成：C、H、O，有些蛋白質(zhì)還會(huì)有S、P和一些金屬元素。 N含量為16%，所以經(jīng)常通過測(cè)定樣品中的N含量來測(cè)定蛋白質(zhì)含量。

2.蛋白質(zhì)的分子量：變化量很大（了解即可）

（四）蛋白質(zhì)的水解

1. 酸水解：不引起消旋作用，得到 L-氨基酸，但色氨酸Trp完全被破壞。

2. 堿水解：引起消旋現(xiàn)象，得到 D-和L-氨基酸的混合物，Trp穩(wěn)定 。

3. 酶水解：不引起消旋作用，也不破壞氨基酸，但水解不徹底，只能斷開某幾種氨基酸。

這里就不詳細(xì)展開了，生化書上的內(nèi)容一定要仔細(xì)看，要掌握。

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第二節(jié)：氨基酸

（一）氨基酸的結(jié)構(gòu)與分類

1. 基本氨基酸（20種）基本氨基酸主要是用來合成蛋白質(zhì)的。

注意：不是所有的氨基酸都是用來合成蛋白質(zhì)的，也有一些以游離狀態(tài)存在，自己發(fā)揮作用。

首先一定要把20種氨基酸的三字母表達(dá)方式背下來，單字母不記也行。

分類（書上內(nèi)容看一下，特別的幾種氨基酸要記一下）：

（1）脂肪族氨基酸（15種）：重點(diǎn)是每個(gè)氨基酸帶了什么基團(tuán)，這個(gè)要區(qū)分開。像半胱氨酸帶了巰基（形成二硫鍵）等等。

（2）芳香族氨基酸

（3）雜環(huán)氨基酸：紫外吸收光譜

（2）（3）部分考得不多，了解每個(gè)包含什么氨基酸即可。

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①非極性氨基酸（8個(gè)）：丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、脯氨酸；

②不帶電荷的極性性氨基酸：絲氨酸、蘇酸酸、酪氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺、半胱氨酸、甘氨酸；

③酸性氨基酸：天冬氨酸、谷氨酸；

④堿性氨基酸：賴氨酸、精氨酸、組氨酸。

按極性分類的氨基酸是一定要記的，很重要。

2.不常見的蛋白質(zhì)氨基酸羥脯氨酸（了解即可）

3.非蛋白質(zhì)氨基酸

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（二）氨基酸的性質(zhì)

1. 物理性質(zhì)

旋光性、苯環(huán)氨基酸吸收光譜、氨基酸滴定曲線（沒必要）

2. 化學(xué)性質(zhì)

（1）氨基的反應(yīng)（重點(diǎn)）

①酰化：形成一個(gè)基團(tuán)用來保護(hù)氨基。

②與亞硝酸作用：很重要，與凱氏定氮法類似，通過氮?dú)獾漠a(chǎn)生量來推測(cè)蛋白質(zhì)的量。

③與醛反應(yīng)：形成西佛堿

④與本異硫氰酸酯（PITC）反應(yīng)：通過不斷解離含氮端氨基酸，用以分析蛋白質(zhì)序列，很重要的反應(yīng)，要掌握。

⑤磺酰化

⑥與2,4-二硝基氟苯（DNFB）反應(yīng)，丹磺酰氯效果更好

⑦轉(zhuǎn)氨反應(yīng)：蛋白質(zhì)代謝，通過轉(zhuǎn)氨酶實(shí)現(xiàn)氨基轉(zhuǎn)移

（2）羧基的反應(yīng)：不重要，簡(jiǎn)單看看即可。

（3）與茚三酮反應(yīng)：脯氨酸不同，可以通過釋放二氧化碳的量來推測(cè)氨基酸含量。

（4）側(cè)鏈的反應(yīng)（記一些比較常見的）：

①二硫鍵：可以通過兩種方式斷裂（氧化、還原）

②烷化

③與重金屬反應(yīng)

（5）氨基酸的檢驗(yàn)（很重要！選擇題容易出）

①pauly反應(yīng)

②坂口反應(yīng)反應(yīng)的過程不用管，但要知道每個(gè)反應(yīng)對(duì)應(yīng)的氨基酸是什么。

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（三）色譜與氨基酸的分析分離

1. 基本原理（了解）

高效液相層析HPLC原理要了解，流動(dòng)相和固定相的狀態(tài)不是一定的等等。

2.色譜的分類（自己回去要看一下）

按流動(dòng)相分為：氣相、液相、超臨界色譜按介質(zhì)可分為：紙層析、薄層層析、柱層析等按分離機(jī)制分為：吸附層系（抗原抗體）、分配層析、分子篩層析等（原理都要了解，要去看書）

3.色譜的應(yīng)用

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第三節(jié)：蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)

（一） 肽鍵和肽

注意一下，肽面中的碳碳單鍵不能旋轉(zhuǎn)。

（二）肽的理化性質(zhì)

（三）一級(jí)結(jié)構(gòu)的測(cè)定

一般的測(cè)定步驟很重要，萬一出一個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的大題，要能答出幾個(gè)步驟。

1. 常用方法：

①N末端（紅寶書上很清楚，要仔細(xì)看一下）；②C末端。




2.  肽鏈的完全水解和氨基酸組成的測(cè)定。

3.  肽鏈的部分水解和肽段的分離。要知道胰蛋白酶作用在哪里、胃蛋白是哪些、溴化氫等等知識(shí)點(diǎn)。

4. 多肽鏈中氨基酸順序的測(cè)定

5. 二硫鍵位置的確定（結(jié)合書來理解）

（四）多肽合成（不是重點(diǎn)可以不用看）  

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第四節(jié)：蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)

構(gòu)型構(gòu)象和二面角了解即可，不是重點(diǎn)。

（二）二級(jí)結(jié)構(gòu)

一條肽鏈在一級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上，通過氫鍵作用形成的高級(jí)結(jié)構(gòu)。

1. α-螺旋轉(zhuǎn)一圈多少氨基酸？直徑？影響α-螺旋生成的氨基酸有哪些？自己都要看。

2. β-折疊：平行折疊和反平行折疊？二面角？Φ角？容易出現(xiàn)在纖維蛋白。

3. β-轉(zhuǎn)角：球狀蛋白表面，肽鏈曲折形成。

4. 無規(guī)則卷曲：其實(shí)也是有一定規(guī)則的。

5. 超二級(jí)結(jié)構(gòu)：結(jié)構(gòu)域

（三）蛋白質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)

（四）蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)

血紅蛋白往往具有別構(gòu)效應(yīng)，亞基之間影響變化。

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第五節(jié)：蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系

別構(gòu)效應(yīng)要弄清楚，正協(xié)同、負(fù)協(xié)同？一定要用比較專業(yè)的術(shù)語進(jìn)行回答。分子病的概念？共價(jià)修飾：磷酸化、乙酰化等等一級(jí)結(jié)構(gòu)的斷裂：酶激活，發(fā)揮活性。

第六節(jié)：蛋白質(zhì)的性質(zhì)

1. 沉降系數(shù)：不同的分子質(zhì)量在不同的液體中沉降系數(shù)不同，具體的自己去了解。

2. 分子排阻層析法：凝膠顆粒，分子量大的容易洗脫出來，通過曲線可以對(duì)應(yīng)。

3. SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳：帶很多負(fù)電荷，使電荷差異不大

（二）蛋白質(zhì)的酸堿性

等電點(diǎn)的概念很重要pH和pI的關(guān)系？

（三）蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)

丁達(dá)爾效應(yīng)要明白

（四）蛋白質(zhì)的變性

破壞的是高級(jí)結(jié)構(gòu)，不會(huì)破壞肽鏈。導(dǎo)致變性的因素有哪些？影響因素（溫度、pH、有機(jī)溶劑、鹽類等等）表面活性劑的作用？

（五）蛋白質(zhì)的顏色反應(yīng)

1. 雙縮脲反應(yīng)：紫色絡(luò)合物、540nm吸光值、肽鏈太短不能進(jìn)行反應(yīng)

2. 黃色反應(yīng)：遇到硝酸變黃（芳香族）

3. 米倫反應(yīng)

4. 乙醛酸反應(yīng)

5. 坂口反應(yīng)

6. 費(fèi)林試劑：是雙縮脲的發(fā)展，靈敏度高

（六）蛋白質(zhì)的分離提純

1. 粗提：沉淀、分級(jí)、除鹽和濃縮（破壞水化層）

2. 精制