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考研論壇
標(biāo)題: 華中科技大學(xué)2010年生化真題 答案 [打印本頁]
作者: 藍(lán)夜玄心 時間: 2014-3-3 12:55
標(biāo)題: 華中科技大學(xué)2010年生化真題 答案
本帖最后由 藍(lán)夜玄心 于 2014-3-4 10:24 編輯
華中科技大學(xué)
2010年*士研究生入學(xué)考試試題
考試專業(yè)：821生物化學(xué)與分子生物學(xué)
一. 名詞解釋
1. homologous protein
2. telomeres
3. affinity chromatograph
4. error-prone DNA repair
5. serine protease
6. RNA alternative splicing
7. translation initiation complex
8. leuine zipper
二. 填空題
1.糖蛋白的連接方式（ ）( )。
2.有機(jī)磷抑制酶活性的部位（ ）。
3.DNA與蛋白質(zhì)作用的研究的方法有（ ）（ ）。
4.碘值反應(yīng)脂肪酸（ ），皂化值可以計算（ ）。
5.在pH6-8有緩沖作用的氨基酸是（ ），茚三酮反應(yīng)為黃色的氨基酸是（ ）。
6.Edman反應(yīng)試劑（ ），檢測Tyr Pauly反應(yīng)的屬于（ ）化合物。
7.三級結(jié)構(gòu)驅(qū)動力是（ ）血紅蛋白氧結(jié)合曲線為S型的原因（ ）。
8.B族作為輔酶的作用（ ）（ ）( )
9.耐寒植物富含（ ）脂肪酸，使流動性（ ）
10.mRNA前體是（ ），RNA聚合酶Ⅲ的產(chǎn)物是（ ）（ ）（ ）。
11.大腸桿菌DNA連接酶需（ ），哺乳動物DNA連接酶需（ ）。
12.原核生物肽鏈延伸（ ）（ ）（ ）,23SRNA有（ ）功能。
13.組蛋白的修飾方式（ ）（ ）（ ）（ ）。
14.鏈霉素如何抑制蛋白質(zhì)的合成（ ）。
15.“Nick translation”方法標(biāo)記DNA探針需要的酶是（ ）。
三.計算題和簡答題
1.有酶溶液50mg/ml，取0.5ml測定活性，底物從3mol/L變成2.7mol/L，反應(yīng)時間為10min，總共反應(yīng)體系為100ml，此時的反應(yīng)速度為最大的60%。問：
⑴1ml酶溶液的活力單位
⑵酶的比活力
⑶米氏常數(shù)
2.關(guān)于血紅蛋白中嬰兒中γ鏈取代成人的β鏈，143為由Ser變?yōu)?/font>His的意義，為什么BPG和成人結(jié)合的緊密？
3.在原核生物中高效表達(dá)真核基因應(yīng)注意什么？
4.原核和真核的RNA聚合酶的異同點？
5.免疫球蛋白的多樣性的分子基礎(chǔ)？
6.DNA變形和復(fù)性的影響因素？
7.DNA甲基化抑制基因轉(zhuǎn)錄的機(jī)理？
四.論述題
1.形成蛋白質(zhì)的寡聚體的意義？
2.簡述五種重組DNA導(dǎo)入細(xì)胞的方法并說明其原理？
3.保持遺傳信息的穩(wěn)定性和表達(dá)的精確性的機(jī)制？
4.從花藥cDNA文庫中篩選出一300bp的在花藥中特異表達(dá)的cDNA，設(shè)計實驗：
⑴得到該基因的cDNA全序列
⑵分析有無內(nèi)含子
⑶獲得基因啟動子的序列并驗證調(diào)控特異性
作者: 藍(lán)夜玄心 時間: 2014-3-3 12:56
答案
一. 名詞解釋
1. 同源蛋白質(zhì)：在不同生物體內(nèi)行使相同或相似功能的蛋白質(zhì)
2. 端粒酶：在細(xì)胞中負(fù)責(zé)端粒的延長的一種酶，是基本的核蛋白逆轉(zhuǎn)錄酶，可將端粒DNA加至真核細(xì)胞染色體末端。
3. 親和層析：是利用蛋白質(zhì)分子對其配體分子特有的識別能力，也即生物學(xué)親和力，建立起來的一種有效的純化方法。
4. 易錯修復(fù)：在DNA損傷時，缺乏校對功能的DNA聚合酶常在受損部位進(jìn)行DNA復(fù)制以避免細(xì)胞死亡，但同時又導(dǎo)致較高的差錯率的修復(fù)方式。也叫SOS反應(yīng)。
5. 絲氨酸蛋白酶：胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶和彈性蛋白酶是一類蛋白水解酶，因為這些酶的活性中心的特異絲氨酸殘基起關(guān)鍵性作用，所以又稱絲氨酸蛋白酶。
6. RNA選擇性剪接：是指從一個mRNA前體中通過不同的剪接方式（選擇不同的剪接位點組合）產(chǎn)生不同的mRNA剪接異構(gòu)體的過程。
7. 翻譯起始復(fù)合體：由核糖體亞基，一個mRNA模板，一個起始的tRNA分子和起始因子組成并組裝在蛋白質(zhì)合成起始點的復(fù)合物。
8. 亮氨酸拉鏈：出現(xiàn)于DNA結(jié)合蛋白和其它蛋白質(zhì)中的一種結(jié)構(gòu)基元。當(dāng)來自同一個或不同多肽鏈的兩個兩用性的α-螺旋的疏水面（常常含有亮氨酸殘基）相互作用形成一個圈對圈的二聚體結(jié)構(gòu)時就形成了亮氨酸拉鏈。
二. 填空題
1.N-糖肽鏈，O-糖肽鏈
2.絲氨酸羥基
3.酵母單雜交，DNA凝膠滯緩實驗
4.不飽和程度，脂肪酸平均鏈長
5.組氨酸，脯氨酸
6.苯異硫氰酸酯PITC，重氮
7.疏水作用，正協(xié)同同促效應(yīng)
8.傳遞CO2，傳遞一碳單元，電子轉(zhuǎn)移
9.不飽和，增加
10.hnRNA，tRNA，5SrRNA，snRNA
11.NAD+，ATP
12.后續(xù)氨酰-tRNA與核糖體結(jié)合，肽鍵的生成，移位，催化肽鍵形成
13.甲基化，乙酰化，磷酸化，泛素化
14.干擾fMet-tRNA與核糖體結(jié)合
15.DNA聚合酶Ⅰ
三.計算題和簡答題
1. ⑴酶活力單位的定義：在最適條件下，每分鐘內(nèi)催化1μmol底物轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物所需的酶量定義為一個酶活力單位，即1IU=1μmol/min。
那么，0.5mol酶溶液的活力單位為：[(3-2.7)mol/L×0.1L×106]/10min=3×103IU
則，1ml酶溶液的活力單位為6×103IU
⑵比活力計算公式：比活力=活力U/總蛋白mg=6×103IU/50mg=120
⑶米氏方程式：V=Vmax×[S]/(Km+[S])
那么米氏常數(shù)Km=[Vmax/V-1]×[S]=2/3×2.7=1.8
2.胎兒血紅蛋白簡稱HbF，亞基組成為α2γ2。HbF的γ鏈和β鏈很相似，也由146個氨基酸組成，但γ鏈中的H21（第143位）殘基是Ser，而不是β鏈中的His。這樣就減少了BPG（2,3-二磷酸甘油酸）分子結(jié)合部位的正電荷，也即減低了對BPG的親和力。HbF對BPG的親和力減低使得它對氧的親和力增高。因此獨立循環(huán)系統(tǒng)的胎兒能有效地通過胎盤從母體的血液循環(huán)中吸收氧。
3. ⑴用cDNA序列，不要用基因組序列（不要含有內(nèi)含子），因為原核生物沒有內(nèi)含子剪切系統(tǒng)。
⑵需要考慮原核生物密碼子偏好的問題。
⑶高效表達(dá)需要強(qiáng)啟動子。
⑷注意要表達(dá)蛋白的大小，一般情況下大于70KD的蛋白在原核菌種不容易表達(dá)或表達(dá)量地。
⑸所要表達(dá)的蛋白是否需要經(jīng)過修飾才具有活性，原核生物中蛋白質(zhì)修飾系統(tǒng)不同。
4.相同點⑴以雙鏈DNA為模板，以4種核苷酸作為活性前提，并以Mg2+為輔因子。
⑵催化RNA鏈的起始，延伸和終止，不需要引物。
⑶是轉(zhuǎn)錄過程中的核心酶。
⑷結(jié)構(gòu)形態(tài)相同。
不同點⑴分子組成不同：詳細(xì)展開
⑵原核只有一種，真核生物有三種RNA聚合酶
5.Ig多樣性的機(jī)制：編碼Ig各條多肽鏈的胚系基因結(jié)構(gòu)是在不同的染色體或同一條染色體的不同部位，各基因結(jié)構(gòu)中包括編碼V區(qū)，（D），J基因片段群和編碼C區(qū)的C基因。在B細(xì)胞發(fā)育過程中通過基因重排，V，D，J片段或V，J片段隨機(jī)連接，組成V基因，眾多V區(qū)基因片段的組合和輕重鏈的組合，造成Ig的多樣性。此外，片段連接中的不準(zhǔn)確或N-核苷酸的插入，也產(chǎn)生多樣性。
6.DNA變性的影響因素：⑴DNA的均一性⑵G-C含量⑶介質(zhì)中的離子濃度
DNA復(fù)性的影響因素：⑴分子量⑵DNA濃度⑶重復(fù)序列
7. ⑴DNA甲基化導(dǎo)致某些區(qū)域DNA構(gòu)象變化，從而影響了蛋白質(zhì)與DNA的相互作用，抑制了轉(zhuǎn)錄因子與啟動區(qū)DNA的結(jié)合效率。研究表明，DNA甲基化達(dá)到一定程度時，會發(fā)生從常規(guī)的B-DNA向Z-DNA結(jié)構(gòu)的過度，由于Z-DNA結(jié)構(gòu)收縮，螺旋加深，使許多蛋白質(zhì)因子賴以結(jié)合的元件縮入大溝而不利于基因轉(zhuǎn)錄的起始。
⑵甲基化影響限制性內(nèi)切酶對特異位點的切割。
⑶DNA甲基化與組蛋白的修飾相關(guān)，DNA甲基化誘導(dǎo)組蛋白的去乙酰化從而抑制轉(zhuǎn)錄。
⑷DNA甲基化甚至可以使整條染色體失活，如X染色體。
⑸啟動子甲基化會降低甚至失去其起始轉(zhuǎn)錄的活性。
⑹甲基化還會增加該位點的突變頻率。
四.論述題
1.答案也就是四級締合在結(jié)構(gòu)和功能上的優(yōu)越性
⑴降低比表面積，增加蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性
⑵豐富蛋白質(zhì)的功能，以行使更復(fù)雜的功能
⑶提高基因編碼的效率和經(jīng)濟(jì)性
⑷使酶的催化基團(tuán)匯集，提高催化效率
⑸形成一定的幾何形狀，如細(xì)菌鞭毛
⑹適當(dāng)降低溶液滲透壓
⑺具有協(xié)同效應(yīng)和別構(gòu)效應(yīng)，實現(xiàn)對酶活性的調(diào)節(jié)
2.（1）轉(zhuǎn)化法
轉(zhuǎn)化：通過生物學(xué)，物理學(xué)和化學(xué)等方法使外源裸露DNA進(jìn)入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定維持和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化。如果外源DNA分子是病毒（噬菌體）的DNA或cDNA，此過程也稱為轉(zhuǎn)染。
① 直接轉(zhuǎn)化法
有的微生物細(xì)胞就能直接提取外源DNA。
② 化合物誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化法
感受態(tài)細(xì)胞：用二價陽離子(如Mg2+，Ca2+，Mn2+)處理某些受體細(xì)胞，可以使其成為處于對外源DNA的接受比較敏感的生理狀態(tài)的一種細(xì)胞。
③ 接合轉(zhuǎn)化法
通過共體細(xì)胞同受體細(xì)胞間的間接接觸而傳遞外源DNA的方法。整個轉(zhuǎn)化過程涉及到3種有關(guān)的細(xì)菌菌株，稱為三親本接合轉(zhuǎn)化法。此方法主要用于微生物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)化。
④ 電穿孔轉(zhuǎn)化法
利用高壓電脈沖作用，使細(xì)胞膜上產(chǎn)生可逆的瞬間通道，從而促使外源DNA的有效導(dǎo)入。
⑤ 微彈轟擊轉(zhuǎn)化法
基因槍轉(zhuǎn)化法
⑥ 激光微束穿孔轉(zhuǎn)化法
利用直徑很小，能量很高的激光微束照射受體細(xì)胞，可導(dǎo)致受體細(xì)胞膜的可逆性穿孔。
⑦ 超聲波處理轉(zhuǎn)化法
超聲波處理細(xì)胞時可擊穿細(xì)胞膜并形成過膜通道，使外源DNA進(jìn)入細(xì)胞。
⑧ 脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法
將DNA或RNA包裹于脂質(zhì)體內(nèi)，然后進(jìn)行脂質(zhì)體與細(xì)胞膜融合將基因?qū)搿?/div>
⑨ 體內(nèi)注射轉(zhuǎn)化法
將目的基因重組體通過顯微注射裝置直接注入細(xì)胞核內(nèi)。
⑩ 花粉管通道轉(zhuǎn)化法
植物授粉過程中，將外源DNA涂在柱頭上，使DNA沿花粉管通道或傳遞組織通過珠心進(jìn)入胚囊，轉(zhuǎn)化還不具正常細(xì)胞壁的卵，合子及早期的胚胎細(xì)胞。
11 精子介導(dǎo)法
精子同外源DNA共浴后再給卵子受精，使外源DNA通過受精過程進(jìn)入受精卵并整合于受體的基因組中。
12 磷酸鈣轉(zhuǎn)染法
有的動物細(xì)胞能捕獲粘附在細(xì)胞表面的DNA-磷酸鈣沉淀。DNA同CaCl2混合制成DNA-CaCl2溶液；逐滴加入不斷攪拌的Hepers-磷酸鈣溶液，形成DNA-磷酸鈣溶液共沉淀復(fù)合物；用吸管將沉淀復(fù)合物吸附在單層培養(yǎng)的動物細(xì)胞表面。
（2）病毒（噬菌體）顆粒轉(zhuǎn)導(dǎo)法
用病毒（噬菌體）DNA（或RT-DNA）構(gòu)建的克隆載體或攜帶目的基因的克隆載體，在體外包裝成病毒（噬菌體）顆粒后，感染受體細(xì)胞，使其攜帶的重組DNA進(jìn)入受體細(xì)胞，將此過程稱為病毒（噬菌體）顆粒轉(zhuǎn)導(dǎo)法。
3.①從DNA結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性來說，雙鏈互補(bǔ)。
②DNA復(fù)制時采用多點復(fù)制，邊解螺旋邊復(fù)制，確保復(fù)制在短時間完成，避免發(fā)生基因突變。
③DNA聚合酶的模板依賴性，使子代DNA與親代DNA核苷酸順序相同。
④復(fù)制過程中各種修復(fù)機(jī)制，保證了遺傳信息的穩(wěn)定性。
⑤翻譯過程中，氨基酸與氨酰-tRNA特異結(jié)合，保證了表達(dá)的精確性。
⑥翻譯時，密碼子與反密碼子配對也保證了表達(dá)的準(zhǔn)確性。
⑦從大的方面講，有絲分裂和減數(shù)分裂都在遺傳信息穩(wěn)定性的保持中起到了相當(dāng)大的作用。
4.（1）得到該基因的cDNA全序列
通過引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增后，回收純化后，測序分析可得cDNA全序列。
（2）分析有無內(nèi)含子
用該cDNA與花藥中的mRNA做雜交。當(dāng)RNA鏈與cDNA雜交時，互補(bǔ)區(qū)可形成雙鏈，非互補(bǔ)區(qū)依然保持單鏈結(jié)構(gòu)。在電子顯微鏡下可以觀察。如果存在內(nèi)含子的話則可以看到非互補(bǔ)區(qū)。
（3）獲得基因啟動子的序列并驗證調(diào)控特異性
通過生物信息學(xué)的方法，在數(shù)據(jù)庫中找到啟動子序列。在啟動子可能存在的片段的5’-端和3’-端相向分別進(jìn)行缺失，然后再連接起來，利用Northern雜交法檢測RNA的形成情況。顯然，不管是從啟動子的5’端還是3’端進(jìn)行順序缺失，只要缺失進(jìn)入啟動子區(qū)域，RNA量便會大大減少，或完全消失。
作者: 藍(lán)夜玄心
時間: 2014-3-7 14:16
人氣不旺，好傷心！
作者: 釋然謊言
時間: 2014-4-15 22:35
我來捧場，謝謝
作者: 如詩般_寧靜
時間: 2014-4-18 18:26
我也來捧場，嘿嘿~樓主大好人~
作者: 黎明日記_985
時間: 2014-4-18 19:42
捧場來了，弱弱的問一句，還有其他年份的么
作者: 陳澤華424758586
時間: 2014-4-26 15:54
樓主考得什么專業(yè)
作者: 藍(lán)夜玄心
時間: 2014-5-4 13:11
還有些其他的紙質(zhì)材料實在是沒辦法上傳啊！
作者: 會笑的蛋撻
時間: 2015-5-9 09:39
樓主是在讀研究生嗎？求指導(dǎo)啊
作者: 天使美麗
時間: 2015-6-2 17:12
謝謝
作者: 何愛卿
時間: 2015-6-2 22:49
謝謝樓主！
作者: 李紅豆雙魚
時間: 2015-6-27 00:48
贊
作者: 考研之旅360
時間: 2015-7-4 23:31
藍(lán)夜玄心 發(fā)表于 2014-3-3 12:56
答案
一. 名詞解釋1. 同源蛋白質(zhì)：在不同生物體內(nèi)行使相同或相似功能的蛋白質(zhì)2. 端粒酶 ...
贊！！！求復(fù)習(xí)資料和經(jīng)驗
作者: 雪吻塞北
時間: 2015-8-7 09:44
謝謝
作者: 雪吻塞北
時間: 2015-8-7 09:57
謝謝啦
作者: 狗巖大爺很認(rèn)真
時間: 2015-8-8 10:28
問一下，這個專業(yè)考生物化學(xué)上下冊還是只有上冊，還有復(fù)習(xí)資料在哪里買啊，謝謝解答
作者: 斌哥考研
時間: 2015-8-25 23:47
棒棒達(dá)～
作者: zzymmmy
時間: 2015-8-26 07:53
詳細(xì)
作者: zzymmmy
時間: 2015-8-26 07:53
加油
作者: zzymmmy
時間: 2015-8-26 07:53
棒棒的
作者: 友好的小蜘蛛
時間: 2015-8-26 10:14
看不懂
作者: 友好的小蜘蛛
時間: 2015-8-26 10:14
太慢了
作者: 友好的小蜘蛛
時間: 2015-8-26 10:15
太難了
作者: 友好的小蜘蛛
時間: 2015-8-26 10:15
唉
作者: hzhlxy
時間: 2015-10-22 00:01
多謝，還有其他資料可以拍照上傳嗎？
謝謝
作者: 劍的背面
時間: 2015-10-22 00:12
thank
作者: 勤奮2016
時間: 2015-10-22 00:24
藍(lán)夜玄心 發(fā)表于 2014-3-3 12:56
答案
一. 名詞解釋1. 同源蛋白質(zhì)：在不同生物體內(nèi)行使相同或相似功能的蛋白質(zhì)2. 端粒酶 ...
！！！！
作者: ningbda13
時間: 2016-9-21 06:53
樓主好人一生平安。還有其他年份的嗎
作者: ningbda13
時間: 2016-9-21 17:27
樓主好人，還有其他年的嗎？
作者: 星魄
時間: 2016-9-22 18:18
頂一個哦
作者: 星魄
時間: 2016-9-22 18:18
樓主還有其他年份的嗎
作者: 秦衛(wèi)國
時間: 2016-9-22 20:16
棒棒的 贊
作者: 好漢幫
時間: 2016-9-23 18:33
樓主，還沒有其他年份的呀，跪求
作者: 星魄
時間: 2016-9-25 14:50
樓主的資料怎么求啊
作者: 何22
時間: 2016-9-26 19:54
樓主太棒了
作者: 清華我來了5
時間: 2016-9-26 19:58
棒棒的！
作者: 嘿嘿嘿嘿豬豬豬
時間: 2017-4-12 22:56
謝謝樓主[害羞][害羞][害羞]
作者: Constan
時間: 2017-4-18 23:45
題目難度還行吧，好好復(fù)習(xí)130還是可以考到的
作者: happyrose小云
時間: 2017-4-21 14:11
樓主棒棒的，頂一個
作者: 君墨蜀黍
時間: 2018-2-21 21:20
謝謝分享
作者: 盧萌媛LMY
時間: 2018-3-5 18:55
謝謝樓主分享
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